صبغة غرام

التلوين- إزالة التلوين- ثمّ التلوين المعاكس

من جهة ثانية، ثم يكمل المحلول السابق إلى (1 لتر) بالماء المقطر ويترك 24 ساعة أخرى قي الحضان عند نفس درجة الحرارة السابقة

• كما توجد طرق أخرى لمعرفة تصرّف البكتيريا حسب غرام مثل اختبار KOH.
• طريقة تحضير صبغة جرام (الصبغ المركب) لصبغ البكتريا السالبة والموجبة
• (أ‌)صبغة الكريستال فايولت:

يترك المحلول لمدة 24 ساعة قي الحضان عند درجة حرارة 25 درجة

من جهة ثانية، 3- الخطوة الثالثة تشمل تلوّن البكتيريات بمحلول ملطّف -أي قليل التركيز- من الفوكسين المزاد إلى الفينول. (وبذلك ينتج اللون الأحمر لدى البكتيريات السالبة حسب تلوين غرام).

كذلك، ويعود هذا الاختلاف إلى بناء الجدار الخلويّ لديهما فالبكتيريا السالبة تملك طبقة هزيلة من الموريين Murein لكن فوقها طبقة فوسفوليبيد Phospholipid.

• يرشح المحلول بورق ترشيح للتخلص من بلورات الكالسيوم أكسالات الزائدة
• ب‌)صبغة الصفرانين:
• يذاب (2 جرام) من بودرة الصفرانين قي (ا ليتر) ماء مقطر
• (ج) محلول لوجل اليودى:

إضافةً إلى ذلك، 2- في الخطوة الثانية -وهي المهمّة- يختلف تفاعل البكتيريات، فبعد العلاج بالكحول -إيتانول (96%)- تفقد البكتيريا السالبة لونها المكتسب بدايةً بينما لا تتخلّى الموجبة عن لونها الأزرق الغامق الذي اكتسبته.

ومن ناحية أخرى، هذه المرحلة -أي العلاج بالكحول- تتوجّب بعض الخبرة لتحديد تشخيصٍ أكيدٍ.

وفي السياق ذاته، 1- في المرحلة الأولى يتمّ التلوين ببنفسجي غنتيان (أو المعروف بـ Crystal violet) المضاف إلى الفينول Phenol (المعروف تاريخيّا بالكاربول Carbol). البكتيريا الموجبة والسالبة حسب غرام تتلوّنان إذ ذاك.ثم تعالج البكتيريات بمحلول لوغول Lugol وتتكوّن حينها مركّبات من موادّ التلوين.

ومن ناحية أخرى، يذاب (1 جرام) من بودرة كريستال فايولت في (80 ملى كحول 85%) ثم يضاف (1 جرام كالسيوم أكسالات) للمحلول السابق

من جهة ثانية، بينما يتوفّر لدى الموجبة غلاف سميك من الموريين متعدّد الطبقات التي بينها يتجمّع محلول لوغول. وهنا يكون تأثير الإيتانول مجفّفًا حيث تبقى تجمّعات الألوان متوفّرةً في الجدار الخلوي.

يوزن (ا جرام) من اليود بالإضافة إلى

يذاب (1 جرام) من يوديد البوتاسيوم قي (300 مل) ماء مقطر

المصدر

من جهة ثانية، C. Gram: Über die isolierte Färbung der Schizomyceten in Schnitt- und Trockenpräparaten. In: Fortschritte der Medizin. Vol. 2, 1884, S. 185-189.

اقرأ كذلك

ليستيريا

طريقة صبغ البكتيريا بها

الطريقة تتألّف من ثلاث خطوات هي:

غرام-موجبة: وتتلوّن إجمالًا باللون الأزرق الغامق

كذلك، غرام-سالبة: تبقى عبر غرام دون تلوين - وإنّما تلوّن باللون الأحمر عبر الفوكسين

من جانب آخر، ينتج عن ذلك تشخيص مختلف حسب سماكة الجدار الخلويّ للبكتيريا المعيّنة وبالتالي أدوية مختلفة للعلاج. البكتيريات السالبة والموجبة تتجاوب إذًا بشكل مختلف مع المضادّات الحيويّة. بهذه الطريقة التي تستغرق القليل من الوقت (على وجه التقريب خمس دقائق) يستطيع الانسان أن يحدّد التصرّف البكتيريّ حسب غرام وبالتالي أن يحدّد طريقة البدء مباشرة بعلاج غالبًا ما يكون منقذًا لحياة المريض حتّى قبل التحديد النهائيّ لنوع البكتيريا والذي يستغرق الكثير من الأيّام.