الاليزا ELISA

تم النشر اليوم 05-12-2025 | الاليزا ELISA
الفهرس الاليزا ELISA يعتبر من الاختبارات المهمهيتم في plate والفكره تقوم على أن نضيف الأجسام المضادة المعلمه بالانزيم الي الانتجين ونعمل غسيل[+] اذا تم الارتباط antigen antibody reaction الغسيل لايوثر على الارتباط و يظلوا مرتبطينالخطوة التانيه نضيف مادة تفاعلsubstrate يعمل عليها الأنزيم ويغير لونها[+] تكون الأجسام المضادة المعلمه بالانزيم مرتبطة بالانتجين بالتالي الأنزيم موجود فعند اضافه substrate يغير اللون[_] تكون الأجسام المضادة المعلمه بالانزيم غير مرتبطة بالانتجين وعند الغسيل (بمادة غسيل) يتم التخلص منهم وعند إضافة substrate لا يحدث تغير في اللون لانه الأنزيم غير موجود ببساطه لو في الأنزيم حيشتغل على مادة التفاعل ويغير لونها لو ما في ما حيحصل تغير يلا بكون موجود الانزبم متين ؟لمن يكون حدث تفاعل بين الانتجين والاجسام المضادة بالتالي ماده الغسيل ما حتستطيع انه تتفكفكهم وتتخلص منهممهمه ماده الغسيل من كل الانتجين والاجسام المضادة اذا غير مرتبطه زي ما قلنا في الأول انه التفاعل بين الانتجين والاجسام المضادة antigen antibody reaction غير مرئيو فكره الاختبارات المناعبه انه عايزين حاجه مرئيه نعرف بيها حصل تفاعل ولا لا يوجد نوعين من اختبار الاليزامباشرغير مباشر اختبار الاليزا المباشر direct :-يتم به الكشف عن الانتجين المتطلبات :-1- بليت مغطى بالانتجين PLATE coated by antigen يتم تحضيره بطريقه معينه (يوضع الانتجين المراد معرفته في PLATE قاعدته flat )2- أجسام مضادة معلمه بالانزيم (دي بتكون جاهزة) antibody linked by enzyme3- مادة التفاعل substrate4- مادة الغسيل5- ماده إيقاف التفاعل stop طريقة الاختبار :-يتم أضافه الأجسام المضادة المعلمه بالانزيم في البليت المغطى بالانتجين ويترك فتره معينه في درجه حراره 25 م ( incubation )بعدها يتم الغسيل بمادة الغسيل لكي يتخلص من الأشياء غير المرتبطة وتبقى الأشياء المرتبطهبعد الغسيل يتم التجفيف جيدابعدها يتم أضافه substrate لفتره محددةالخطوة الاخيره إضافة stop لوقف التفاعل (لكي لا يواصل التفاعل ويغير اللون اكتر من اللازم ويعطي نتيجه خاطئه ) لمعرفة النتيجه+ أو –يمكن بالعين المجردة حيث يتغير اللون في العينات الموجبة (لحدوث التفاعل بين الأنزيم ومادة التفاعل ) . بينما لا يتغير اللون في العينات السالبة لمعرفه كمية الانتجين titreيوضع الPLATE في جهازreader يقرأ الطول الموجي للألوان ويعطي أرقام يتم حسابها بطريقه معينه اختبار الاليزا المباشريمكن أن يتم به الكشف عن الأجسام المضادةالمتطلبات1- بليت مغطى بانتجين معروف PLATE coated b antigen (يوضع الانتجين المعروف في PLATE قاعدته flat )2- عينات الدم المراد فحصها الفكره(معرفه اذا كانت تملك أجسام مضادة ولا لا)2- أجسام مضادة معلمه بالانزيم (دي بتكون جاهزة) antibody linked by enzyme3- مادة التفاعل substrate4- مادة الغسيل5- ماده إيقاف التفاعل stop طريقة الاختبار :-1-يتم إضافة عينات الدم المراد فحصها الي البليت المغطى بالانتجين المعلوم ويترك لفتره زمنيه محدده في درجه حراره 25م incubation2- بعدها يتم الغسيل بمادة الغسيل (حيث يتم التخلص من كل من الأجسام المضادة والانتجين الغير مرتبطين ) ويتم التجفيف جيدا.3-يتم أضافه الأجسام المضادة المعلمه بالانزيم في البليت المغطى بالانتجين ويترك فتره معينه في درجه حراره 25 م ( incubation )4-بعدها يتم الغسيل بمادة الغسيل لكي يتخلص من الأشياء غير المرتبطة وتبقى الأشياء المرتبطهبعد الغسيل يتم التجفيف جيدا5-بعدها يتم أضافه substrate لفتره محددة6- الخطوة الاخيره إضافة stop لوقف التفاعل (لكي لا يواصل التفاعل ويغير اللون اكتر من اللازم ويعطي نتيجه خاطئه ) لمعرفة النتيجه+ أو –يمكن بالعين المجردة حيث يتغير اللون في العينات السالبهبعد إضافة الأجسام المضادة للانتجين ولم يتم الارتباط معناه لمن نغسل حيتم التخلص من الأجسام المضادة الغير مرتبطهلمن تجي تضيف الأجسام المضادة المعلمه بالانزيم الخاصه بهذا الانتجين حترتبط بيو لمن نغسل ما حتطلع مع ماده الغسيل لأنها مرتبطهلمن نجي نضيف مادة التفاعل حتلقى الأنزيم يشتغل عليها ويغير اللون لمعرفة النتيجه+ أو –يمكن بالعين المجردة حيث لا يتغير اللون في العينات الموجبهبعد إضافة الأجسام المضادة للانتجين ويتم الارتباط معناه لمن نغسل ما حيتم التخلص من الأجسام المضادة لأنها مرتبطهلمن تجي تضيف الأجسام المضادة المعلمه بالانزيم الخاصه بهذا الانتجين ما حترتبط بيو لانه مرتبطلمن نغسل حتطلع مع ماده الغسيل لأنها غير مرتبطهلمن نجي نضيف مادة التفاعل ما حتلقى الأنزيم يشتغل عليها ويغير اللون الاليزا التنافسيه competitive ELISAلانه تتنافس الأجسام المضادة المعلمه بالانزيم و الأجسام المضادة(الموجودة في عينات السيرم )المراد فحصها في الارتباط بالانتجيناذا ارتبطت المعلمه بالانزيم تغير اللون لأنها تتفاعل مع مادة التفاعل كدا النتيجه سالبه يعني ما في أجسام مضادة في السيرم للانتجين المعينولو ارتبطت الاجسام المضادة المراد فحصها مع الانتجين معناه الأجسام المضادة المعلمه بالانزيم ما حتلقى طريقه ترتبط مع الانتجين ويتم التخلص منها عند الغسيل بالتالي م يتغير اللون الاليزا ELISA يعتبر من الاختبارات المهمهيتم في plate والفكره تقوم على أن نضيف الأجسام المضادة المعلمه بالانزيم الي الانتجين ونعمل غسيل[+] اذا تم الارتباط antigen antibody reaction الغسيل لايوثر على الارتباط و يظلوا مرتبطينالخطوة التانيه نضيف مادة تفاعلsubstrate يعمل عليها الأنزيم ويغير لونها[+] تكون الأجسام المضادة المعلمه بالانزيم مرتبطة بالانتجين بالتالي الأنزيم موجود فعند اضافه substrate يغير اللون[_] تكون الأجسام المضادة المعلمه بالانزيم غير مرتبطة بالانتجين وعند الغسيل (بمادة غسيل) يتم التخلص منهم وعند إضافة substrate لا يحدث تغير في اللون لانه الأنزيم غير موجود ببساطه لو في الأنزيم حيشتغل على مادة التفاعل ويغير لونها لو ما في ما حيحصل تغير يلا بكون موجود الانزبم متين ؟لمن يكون حدث تفاعل بين الانتجين والاجسام المضادة بالتالي ماده الغسيل ما حتستطيع انه تتفكفكهم وتتخلص منهممهمه ماده الغسيل من كل الانتجين والاجسام المضادة اذا غير مرتبطه زي ما قلنا في الأول انه التفاعل بين الانتجين والاجسام المضادة antigen antibody reaction غير مرئيو فكره الاختبارات المناعبه انه عايزين حاجه مرئيه نعرف بيها حصل تفاعل ولا لا يوجد نوعين من اختبار الاليزامباشرغير مباشر اختبار الاليزا المباشر direct :-يتم به الكشف عن الانتجين المتطلبات :-1- بليت مغطى بالانتجين PLATE coated by antigen يتم تحضيره بطريقه معينه (يوضع الانتجين المراد معرفته في PLATE قاعدته flat )2- أجسام مضادة معلمه بالانزيم (دي بتكون جاهزة) antibody linked by enzyme3- مادة التفاعل substrate4- مادة الغسيل5- ماده إيقاف التفاعل stop طريقة الاختبار :-يتم أضافه الأجسام المضادة المعلمه بالانزيم في البليت المغطى بالانتجين ويترك فتره معينه في درجه حراره 25 م ( incubation )بعدها يتم الغسيل بمادة الغسيل لكي يتخلص من الأشياء غير المرتبطة وتبقى الأشياء المرتبطهبعد الغسيل يتم التجفيف جيدابعدها يتم أضافه substrate لفتره محددةالخطوة الاخيره إضافة stop لوقف التفاعل (لكي لا يواصل التفاعل ويغير اللون اكتر من اللازم ويعطي نتيجه خاطئه ) لمعرفة النتيجه+ أو –يمكن بالعين المجردة حيث يتغير اللون في العينات الموجبة (لحدوث التفاعل بين الأنزيم ومادة التفاعل ) . بينما لا يتغير اللون في العينات السالبة لمعرفه كمية الانتجين titreيوضع الPLATE في جهازreader يقرأ الطول الموجي للألوان ويعطي أرقام يتم حسابها بطريقه معينه اختبار الاليزا المباشريمكن أن يتم به الكشف عن الأجسام المضادةالمتطلبات1- بليت مغطى بانتجين معروف PLATE coated b antigen (يوضع الانتجين المعروف في PLATE قاعدته flat )2- عينات الدم المراد فحصها الفكره(معرفه اذا كانت تملك أجسام مضادة ولا لا)2- أجسام مضادة معلمه بالانزيم (دي بتكون جاهزة) antibody linked by enzyme3- مادة التفاعل substrate4- مادة الغسيل5- ماده إيقاف التفاعل stop طريقة الاختبار :-1-يتم إضافة عينات الدم المراد فحصها الي البليت المغطى بالانتجين المعلوم ويترك لفتره زمنيه محدده في درجه حراره 25م incubation2- بعدها يتم الغسيل بمادة الغسيل (حيث يتم التخلص من كل من الأجسام المضادة والانتجين الغير مرتبطين ) ويتم التجفيف جيدا.3-يتم أضافه الأجسام المضادة المعلمه بالانزيم في البليت المغطى بالانتجين ويترك فتره معينه في درجه حراره 25 م ( incubation )4-بعدها يتم الغسيل بمادة الغسيل لكي يتخلص من الأشياء غير المرتبطة وتبقى الأشياء المرتبطهبعد الغسيل يتم التجفيف جيدا5-بعدها يتم أضافه substrate لفتره محددة6- الخطوة الاخيره إضافة stop لوقف التفاعل (لكي لا يواصل التفاعل ويغير اللون اكتر من اللازم ويعطي نتيجه خاطئه ) لمعرفة النتيجه+ أو –يمكن بالعين المجردة حيث يتغير اللون في العينات السالبهبعد إضافة الأجسام المضادة للانتجين ولم يتم الارتباط معناه لمن نغسل حيتم التخلص من الأجسام المضادة الغير مرتبطهلمن تجي تضيف الأجسام المضادة المعلمه بالانزيم الخاصه بهذا الانتجين حترتبط بيو لمن نغسل ما حتطلع مع ماده الغسيل لأنها مرتبطهلمن نجي نضيف مادة التفاعل حتلقى الأنزيم يشتغل عليها ويغير اللون لمعرفة النتيجه+ أو –يمكن بالعين المجردة حيث لا يتغير اللون في العينات الموجبهبعد إضافة الأجسام المضادة للانتجين ويتم الارتباط معناه لمن نغسل ما حيتم التخلص من الأجسام المضادة لأنها مرتبطهلمن تجي تضيف الأجسام المضادة المعلمه بالانزيم الخاصه بهذا الانتجين ما حترتبط بيو لانه مرتبطلمن نغسل حتطلع مع ماده الغسيل لأنها غير مرتبطهلمن نجي نضيف مادة التفاعل ما حتلقى الأنزيم يشتغل عليها ويغير اللون‬: بعد الاستوب طوالي بناخد البليد للقرايه الاليزا التنافسيه competitive ELISAلانه تتنافس الأجسام المضادة المعلمه بالانزيم و الأجسام المضادة(الموجودة في عينات السيرم )المراد فحصها في الارتباط بالانتجيناذا ارتبطت المعلمه بالانزيم تغير اللون لأنها تتفاعل مع مادة التفاعل كدا النتيجه سالبه يعني ما في أجسام مضادة في السيرم للانتجين المعينولو ارتبطت الاجسام المضادة المراد فحصها مع الانتجين معناه الأجسام المضادة المعلمه بالانزيم ما حتلقى طريقه ترتبط مع الانتجين ويتم التخلص منها عند الغسيل بالتالي م يتغير اللون